Análise Integrativa das Respostas Moleculares, Celulares, Sistêmicas e Comportamentais a Cepas Amazônicas de Toxoplasma gondii em Modelo Murino

O presente estudo propõe investigar alterações comportamentais, morfológicas e quantitativas na micróglia residente no hipocampo e na retina a partir da resposta inflamatória do hospedeiro adulto à infecção pelo parasita Toxoplasma gondii. Para tanto, serão aplicados dois testes comportamentais: tarefa exploratória do campo aberto e teste de discriminação olfatória, em um grupo de camundongos fêmeas da linhagem BALB/c, com aproximadamente 4 meses de idade, submetidos à infecção no olho esquerdo com 5μl de solução infectada com 48,5x106 parasitas/ml, aproximadamente 2x104 parasitas por animal. Outro grupo de mesma idade, sexo e linhagem será submetido à inoculação de 5μl de solução salina. Após os testes nos momentos pré e pós-infecção, os camundongos serão anestesiados e seus cérebros perfundidos com solução salina, seguido de paraformaldeído 4%, dissecados e cortados em vibrátomo para geração de séries secções anatômicas. Os tecidos cerebrais e retina serão processados para imunomarcação específica para micróglia (IBA-1). Empregaremos metodologias sem viés baseadas na estereologia, com o objetivo de estimar alterações do número, além de realizar a reconstrução microscópica tridimensional para documentar mudanças na morfologia das células em estudo.