INVESTIGAÇÃO MORFOLÓGICA, MOLECULAR E FUNCIONAL DO HIPOCAMPO DE CAMUNDONGOS EXPOSTOS AO FLÚOR

O flúor (F) é amplamente utilizado em diferentes veículos, incluindo água de abastecimento e dentifrícios, em virtude de sua efetividade no controle da doença cárie. Também é encontrado naturalmente em reservatórios hídricos, ou mesmo proveniente de rejeitos industriais e da queima do carvão, caracterizando como um possível poluente ambiental, capaz de gerar fluorose dentária e esquelética. Sabe-se também que a ingestão por longos períodos, mesmo em baixas doses, é capaz de promover alterações em diferentes órgãos e sistemas, dessa forma, tem-se sugerido que o F tem potencial neurotóxico, colocando em discussão a segurança da fluoretação da água de abastecimento doméstico. Sendo assim, este estudo buscará investigar os efeitos da exposição sistêmica por longo período ao F sobre o hipocampo de camundongos a partir de parâmetros morfológicos, moleculares e funções cognitivas de memória e aprendizado. Para isso, serão administradas durante o período de 60 dias, duas concentrações de F (na forma de fluoreto de sódio) em água a camundongos machos: 10mg/L e 50mg/L, que são concentrações para roedores equivalentes às concentrações de água de abastecimento artificialmente fluoretada e água naturalmente fluoretada em regiões endêmicas de fluorose consumidas por seres humanos, respectivamente; o grupo controle receberá somente água isenta de adição de F. Após o período experimental, as funções hipocampais serão avaliadas pelos testes de Labirinto Aquático e Esquiva Inibitória, seguido pela eutanásia e coleta do sangue para as análises de níveis de F e do hipocampo, para análise de parâmetros antioxidantes e pró-oxidantes, além do perfil de transcrição gênica por Microarray e proteômica por Espectrometria de Massas (UPLC/MS). Alguns animais serão perfundidos para avaliações ultraestruturais por Microscopia Eletrônica de Transmissão, e imunohistoquímicas para análise das populações celulares de neurônios, astrócitos e micróglia, neurogênese por Ki67 e DCX, dos componentes sinápticos MAP2, Sinaptofisina e PSD95, e de marcadores inflamatórios COX1 e 2, IL-1&#946; e iNOS. Após a tabulação dos resultados, será aplicado o teste ANOVA 1-via com teste post-hoc de Tukey para os dados paramétricos, e Kruskal-Wallis com teste post-hoc de Dunn para os dados não-paramétricos, adotando p<0,05; os resultados obtidos do UPLC/MS serão analisados pelo software ProteinLynx GlobalSERVER, através do algoritmo de Monte-Carlo, seguido por análises de bioinformática no software Cytoscape e linguagem de programação R.