PESQUISA DE APICOMPLEXOS ZOONÓTICOS EM Kinosternon scorpioides CATIVOS NO BIOMA AMAZÔNIA

Poucos são os estudos que investigam apicomplexos zoonóticos em quelônios e, a falta de conhecimento sobre a epidemiologia dessas doenças nesses animais, as particularidades anatômicas e o comportamento assintomático dificultam o diagnóstico clínico. Por isso, o diagnóstico molecular é fundamental para avaliação de condições clínicas para nortear o manejo adequado de animais cativos e para produção de informação em Saúde Única. O objetivo do projeto é detectar DNA de protozoários zoonóticos do filo Apicomplexa em Kinosternon scorpioides cativos no bioma Amazônia. Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética no Uso de Animais, da Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), Campus Belém (CEUA/UFRA, protocolo nº 004/2012) e pelo Sistema de Autorização e Informação sobre Biodiversidade do Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (SISBIO/ICMBIO, protocolo nº 1602685). Os quelônios do estudo pertencem a espécie K. scorpioides cativas em um mantenedor conservacionista no Campus sede da Universidade Federal Rural da Amazônia-UFRA em Belém do Pará (1°27’26.7”S 48°26’19.7”W), na área destinada ao Projeto Bio-Fauna do Instituto Socioambiental e dos Recursos Hídricos (ISARH) /UFRA. No processamento de Amostras será utilizado no estudo amostras que pertencem ao banco de DNA do Laboratório de Zoonoses e Saúde Pública (LZSP), localizado no Instituto de Medicina Veterinária da Universidade Federal do Pará (UFPA), município de Castanhal, estado do Pará. Serão submetidas a biologia molecular amostras extraídas de coágulos (n=40), lavado estomacal (n=40), lavado cloacal (n=40) e fluído cloacal (n=27), somando um total de um total de 147 amostras. Para extração de DNA, as amostras de fluído cloacal, lavado estomacal, lavado cloacal e coágulo sanguíneo foram processadas com o Kit IllustraTM Tissue and Cell Prep Mini Spin (GE Healthcare®) conforme as instruções do fabricante. Em seguida as amostras serão testadas pela reação da polimerase para as seguintes espécies de aplicomplexo zoonótico: Neospora caninum, Cryptosporidium spp, Sarcocystis spp e Cyclospora cayetanensis. As amostras que apresentarem positividade nas análises moleculares, serão purificadas de acordo com o kit comercial EZ- 10 Spin Column PCR Products Purification kit e sequenciadas em sequenciador automático (ABI PRISM 3500 Genetic Analyzer, Applies Biosystems®), segundo o protocolo de seqüenciamento ABI PRIMS Big Dye Terminator.